马钱子的鉴别方法

理化鉴别
1.取胚乳切片，加硫钒酸1滴，显蓝紫色（番木鳖碱反应）；另取切片加浓硝酸，显橙红色（马钱子碱反应）。
2.取该品粗粉1 g,加乙醇15 ml,冷浸2小时，滤液蒸干，以1N盐酸溶解，加氢氧化铵碱化，氯仿提取，氯仿液再用1N盐酸提取，酸液中加锌粉及浓盐酸，水浴加热5分钟，冷却后加亚硝酸溶液1滴，即显樱红色 （番木鳖碱反应）．
3.薄层层析：⑴ 马钱子碱。⑵ 番木鳖碱。⑶ 马钱子（对照药材）。⑷ 云南马钱（对照药材）。⑸ 马钱子（商品）。⑹ 制马钱。
样 品 液：取粉末0.5 g,加氯仿-乙醇（10∶1）混合液5 ml及浓氨水溶液0.5 ml,振摇5分钟，放置2小时，滤液供试；
对照品液：另取番木鳖碱，马钱子碱加氯仿溶解，制成每1 ml各含2 mg的混合液作对照溶液．
展 开：取10μl分别点样于同一硅胶G板上，用甲苯-丙酮-乙醇-浓氨溶液展开．
显 色：喷稀碘化铋钾试液,对照品显两橙色斑点，马钱子碱在下方，番木鳖碱在上方，供试品显相同的色斑。

含量测定
用高效液相色谱法测定．色谱条件与系统适用性试验：用硅胶为填充剂；正己烷－二氯甲烷一甲醇一浓氨试液（42.5:42.5:5:0.35）为流动相；检测波长为254nm．理论板数按士的宁峰计算应不低于2000．
对照品溶液的制备：精密称取士的宁对照品适量，加醋酸乙酷制成每1ml含0.4mg的溶液，供试品溶液的制备：取该品粉末（过三号筛）约0.5g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加氯仿25ml与浓氨试液1ml,密塞，轻轻振摇，称定重量，放置24小时，再称定重量，用氯仿补足减失的重量，充分振摇，滤过，精密量取滤液10ml,置分液漏斗中，用硫酸溶液（3→100）提取5次，每次15ml,合并硫酸液，加浓氨试液调节pH值至9～10,用氯仿提取5次，每次20ml,合并氯仿液，蒸干，残渣加醋酸乙酯溶解，转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得．
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各4μl,注人液相色谱仪，测定，即得．该品按干燥品计算，含士的宁（C21H22N2O2）应为1.20%～2.20%．

显微鉴定
种子横切面：种皮表皮细胞分化成单细胞毛，向一侧斜伸，长500～ 1100μm，宽约 25μm以上，其部膨大，似石细胞状，直径约75μm，壁极厚，强木化，有纵长扭曲的纹孔，毛的体部肋状木化增厚，胸腔断面观类圆形；种皮内层为舫的棕色薄壁细胸，内胚乳细胞壁厚约25μm ，胞间连丝隐约可见，以碘液处理后较明显，细胞内含脂肪油滴及糊粉粒。
粉末：灰黄色。
①非腺毛单细胞，大多断裂，完整者长至1100μm，直径25～63μm，壁强木化，基部似石细胞状，壁极厚，纹孔纵裂缝状，毛体部向一方倒伏，圆柱形，顶端钝圆，有 5～18条肋状增厚，易纵裂成裂片，宛如纤维，单个裂片直径3～9μm，有的裂片再 2～ 3不完全纵裂。
②内胚乳细胞多角形、长多角形或类圆形，壁较厚或甚厚，隐约可见极细密的孔沟，有的胞间层呈细波状弯曲，内含脂肪油滴、糊粉粒。此外有色素层（种皮内层细胞）。该品以个大饱满、质坚肉厚、 色灰黄、有光泽者为佳。《中华人民共和国药典》1995 年版规定，该品以干燥品计算，含番木鳖碱应为1.20%～2.20%。

化学鉴定
⑴取胚乳切片，加硫钒酸1滴，显蓝紫色（番木鳖碱反应）；另取切片加浓硝酸，显橙红色。（马钱子碱反应）
⑵取马钱子粗粉1g，加乙醇15ml，冷浸2h，滤液蒸干，加1mol/L盐酸溶解，以氧氢化铵试液碱化，氯仿提取，氯仿液再以1mol/L盐酸提取，酸液中加锌粉及浓盐酸，水浴加热5min，冷后加亚硝酸溶液1滴，即显樱红色。（番木鳖碱反应）
（3）薄层层析：取粉末0.5g，加氯仿-乙醇（10:1)混合液5ml及浓氨水溶液0.5ml，振摇5min，放置2h，滤液供试，另取番木鳖碱、马钱子碱加氯仿溶解，制成每1ml各含2mg的混合液作对照。各取10μl分别点样于同一硅胶G板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨溶液（40:50:6:4) 展开15cm，取出晾干，喷以稀碘化铋试液，对照品显两橙色斑点，马钱子碱在下方，番木鳖碱在上方，供试品显相同的色斑。
【附注】：同属植物云南马钱S.pierriana A.W.Hill.的种子亦作马钱子入药。

化学成分
马钱种子含多种生物碱，可分为三种类型：
①“正”系列（normal series ）生物碱：番木鳖碱（strychnine），马钱子碱（brucine），异番木鳖碱（isostrychnine），异马钱子碱（isobrucine），番木鳖碱N-氧化物（strychnine N－oxide），马钱子碱N-氧化物（brucine N－oxide），β-可鲁勃林（β－colubrine），16-羟基-β-可鲁勃林（16－hydroxy-β-colubrine），16-羟基-α-可鲁勃林。
②“伪”系列（pseudo series ）生物碱：伪番木鳖碱（pseudo-strychnine），伪马钱子碱（pseudobrucine）。
③“N”-甲基伪”系列（N－methylpseudo series）
生物碱：N-甲基-断-伪番木鳖碱（icajine），番木鳖次碱（vomicine），N-甲基-断-伪马钱子碱（no-vacine）。
种子所含生物碱以“正”系列为主[1-3]。种子经高温加热（220～260℃，3min），剧毒成分番木鳖碱、马钱子碱含量明显降低，而异番木鳖碱、异马钱子碱、番木鳖碱N-氧化物及马钱子碱N-氧化物含量增高。
根皮、根木质部含“正”系列生物碱为主，茎皮含“伪”及“N-甲基伪”系列生物碱为主，叶则含“N-甲基伪”系列生物碱为主。果皮、果肉均含番木鳖碱，马钱子碱，4-羟基番木鳖碱（4-hydroxystrychnine），番木鳖碱N-氧化物，马钱子碱N-氧化物，伪番木鳖碱，伪马钱子碱，N-甲基-断-伪番木鳖碱，番木鳖次碱，N-甲基-断-伪马钱子碱，果肉另含β-可鲁勃林。果肉还含环烯醚单萜类（iridoid）化合物：马钱子甙（loganin），马钱子甙酸（lo－ganic acid），去氧马钱子甙（deoxyloganin），马钱子酮甙（ketolo－ganin），开链马钱子甙（secologanin）。

长籽马钱种子含多种生物碱，可分为三种类型：
①“正”系列生物碱：4-羟基-3-甲氧基-番木鳖碱（4- hydroxy－3－methoxystrychnine），番木鳖碱，马钱子碱，4-羟基番木鳖碱，番木鳖碱N-氧化物，α-可鲁勃林。
②“伪”系列生物碱：伪番木鳖碱，伪马钱子碱。
③“N-甲基伪”系列生物碱：N-甲基-断-伪番木鳖碱，番木鳖次碱，N-甲基-断-伪马钱子碱及4-羟基-3-甲氧基-N-甲基-断-伪番木鳖碱（4－hydroxy－3－methoxy-N－methyl-sec－pseu－dostrychnine）。
种子所含生物碱以“正”系列为主[5]叶则含“N-甲基伪”系列生物碱为主。
此外，叶还含有N-氰基-断-伪番木鳖碱（N-cyano-sec－pseudostrychnine）及N-氰基-断-伪马钱子碱（N－cyano-sec-pseu－dobrucine）